氣相色譜儀是以氣體為流動相的色譜分析儀器，主要用于分離分析易揮發(fā)的物質(zhì)。氣相色譜儀高靈敏度、gao效能、高選擇性、分析速度快、所需試樣量少、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點。在醫(yī)藥衛(wèi)生、石油化工、環(huán)境監(jiān)測、生物化學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。

氣相色譜儀的原理

在加溫的狀態(tài)下使樣品瞬間氣化，由載氣帶入色譜柱，由于氣相色譜儀各組分在固定相與流動相(載氣)間相對吸附能力/保留性能不同而在兩相間進(jìn)行分配，在色譜柱中以不同速度移動，經(jīng)一段時間后得到分離，再依次被載氣帶入檢測器，將各組分的濃度或質(zhì)量轉(zhuǎn)換成電信號變化并記錄成色譜圖，每一個峰代表Z初混合物中不同的組分。峰出現(xiàn)的時間稱為保留時間，可以用來對每個組分進(jìn)行定性，根據(jù)峰的大小(峰面積)對每個組分進(jìn)行定量。

涉及的幾個術(shù)語：

固定相：在色譜分離中固定不動、對樣品產(chǎn)生保留的一相;

流動相：與固定相處于平衡狀態(tài)、帶動樣品向前移動的另一相;

色譜圖：若干物質(zhì)的流出曲線，即在不同時間的濃度或響應(yīng)大小;

保留時間(tR)：樣品注入到色譜峰Zda值出現(xiàn)的時間。

氣相色譜儀的特點

選擇性高：能分離同位素、同分異構(gòu)體等物理、化學(xué)性質(zhì)十分相近的物質(zhì)。

分離效能高：一次可進(jìn)行含有150多個組分的烴類混合物的分離分析。

靈敏度高：氣相色譜可檢測10^-11～10^-13g的物質(zhì)。

分析速度快：一般幾分鐘或幾十分鐘便可完成一個分析周期。

應(yīng)用范圍廣：450℃以下有不低于27～330Pa的蒸氣壓，熱穩(wěn)定性好的物質(zhì)。

缺點：不適應(yīng)于大部分沸點高的和熱不穩(wěn)定的化合物;需要有已知標(biāo)準(zhǔn)物作對照。

氣相色譜儀的系統(tǒng)

氣相色譜儀主要包括五大系統(tǒng)：載氣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和記錄系統(tǒng)?；玖鞒倘缦拢?

1、載氣系統(tǒng)：

可控而純凈的載氣源。氣相色譜儀載氣從起源鋼瓶/氣體發(fā)生器出來后依次經(jīng)過減壓閥、凈化器、氣化室、色譜柱、檢測器，然后放空。

氣相色譜儀載氣必須是純潔的(99.999%)，要求化學(xué)惰性，不與有關(guān)物質(zhì)反應(yīng)。載氣的選擇除了要求考慮對柱效的影響外，還要與分析對象和所用的檢測器相配。常用的載氣有氫氣、氮氣、氦氣等惰性氣體。一般用熱導(dǎo)檢測器時，使用氫氣、氦氣，其它檢測器使用氮氣。

凈化器：多為分子篩和活性碳管的串聯(lián)，可除去水、氧氣以及其它雜質(zhì)。

2、進(jìn)樣系統(tǒng)：

包括氣化室和進(jìn)樣裝置，保證樣品瞬間完全氣化而引入載氣流。常以微量注射器(穿過隔膜墊)將液體樣品注入氣化室。

進(jìn)樣條件的選擇：影響氣相色譜儀分離效率以及分析結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度;

氣化室溫度：一般稍高于樣品沸點，保證樣品瞬間完全氣化;

進(jìn)樣量：不可過大，否則造成拖尾峰，進(jìn)樣量不超過數(shù)微升;柱徑越細(xì)，進(jìn)樣量應(yīng)越少;采用毛細(xì)管柱時，應(yīng)分流進(jìn)樣以免過載;

進(jìn)樣速度(時間)：1秒內(nèi)完成，時間過長可引起色譜峰變寬或變形。

3、分離系統(tǒng)：

分離系統(tǒng)是氣相色譜儀的心臟部分，是在色譜柱內(nèi)完成試樣的分離，因為大多數(shù)分離都強烈依賴于溫度，故色譜柱要安裝在能夠精密控溫的柱箱內(nèi)。

色譜柱的選擇：

①色譜柱的種類

分為填充柱和毛細(xì)管/空心柱兩類。填充柱材質(zhì)多為不銹鋼或玻璃，毛細(xì)管柱的材質(zhì)多為石英。

②固定相的選擇

固體固定相：是表面有一定活性的固體吸附劑，如活性炭、硅膠、氧化鋁分子篩等，不同的分析對象選用不同的吸附劑。

液體固定相：由固定液和載體組成。固定液均勻的涂布在載體表面。

載體：要求比表面積大，化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性好，顆粒均勻，有一定的機(jī)械強度。

固定液的選擇：高沸點有機(jī)液體，在操作范圍內(nèi)蒸汽壓低，熱穩(wěn)定性好，對樣品各組分有適當(dāng)?shù)娜芙饽芰Γx擇性高，揮發(fā)性小，不與樣品發(fā)生化學(xué)反應(yīng)等。一般根據(jù)“相似性原則”選擇固定液，即組分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)或極性與固定液相似時，在固定液中的溶解度就大，保留時間長，有利于相互分離;反之，則溶解度小，保留時間短。常用固定液有甲基聚硅氧烷(如SE-30、OV-17等)、聚乙二醇(如PEG-20M等)。

柱溫的選擇：

氣相色譜儀柱溫可以采用恒溫或程序升溫。

①在能保證R()的前提下，盡量使用低柱溫，但應(yīng)保證適宜的tR()及峰不拖尾，減小檢測本底。

②根據(jù)樣品沸點情況選擇合適柱溫，柱溫應(yīng)低于組分沸點50~100℃，寬沸程樣品應(yīng)采用程序升溫。

程序升溫好處：改善分離效果;縮短分析周期;改善峰形;提高檢測靈敏度。

4、檢測器

檢測器是將流出色譜柱的載氣流中被測組分的濃度(或量)變化轉(zhuǎn)化為電信號變化的裝置，是氣相色譜儀的核心部件之一。檢測器的輸出信號經(jīng)轉(zhuǎn)化放大后成為色譜圖。

氣相色譜儀所用檢測器有熱導(dǎo)池檢測器(TCD)、氫火焰離子化檢測器(FID)、電子捕獲檢測器(ECD)、氮磷檢測器(NPD)等。

①熱導(dǎo)檢測器(TCD)

TCD是一種應(yīng)用較早的通用型檢測器，對任何氣體均可產(chǎn)生響應(yīng)，因而通用性好，而且線性范圍寬、價格便宜、應(yīng)用范圍廣，但靈敏度較低?，F(xiàn)仍在廣泛應(yīng)用。它由金屬池體和裝入池體內(nèi)兩個完全結(jié)稱孔道內(nèi)的熱敏元件所組成，是基于被分離組分與載氣的導(dǎo)熱系數(shù)不同進(jìn)行檢測。所有氣體都能夠?qū)?，但是氫氣和氦氣的熱?dǎo)系數(shù)Zda，故是優(yōu)選的載氣。

②氫火焰電離檢測器(FID)

FID是使用Z廣泛的檢測器，它是利用有機(jī)物在H2-Air燃燒的高溫火焰中電離成正負(fù)離子，并在外加電場的作用下作定向移動形成電子流，其電流的強度與單位時間內(nèi)進(jìn)入檢測器離子室的待測組分含碳原子的數(shù)目有關(guān)，所以它適用于含碳有機(jī)物的測定。FID為典型的質(zhì)量型檢測器，具有結(jié)構(gòu)簡單、穩(wěn)定性好、靈敏度高、響應(yīng)迅速、比熱導(dǎo)檢測器的靈敏度高出近3個數(shù)量級。對有機(jī)化合物具有很高的靈敏度，但對無機(jī)氣體、水、四氯化碳等含氫少或不含氫的物質(zhì)靈敏度低或不響應(yīng)。

FID檢測器氣體流速：

氣相色譜儀FID檢測器須使用三種不同氣體：載氣、氫氣(燃?xì)?和空氣(助燃?xì)?，通常三種氣體的流速比約為1：1：10。

FID檢測器溫度：

溫度對FID檢測器的靈敏度和噪聲的影響不顯著，為了防止有機(jī)物冷凝，一般控制在比柱溫箱高30℃～50℃。此時氫在檢測器中燃燒生成水，以水蒸汽逸出檢測器，若溫度低，水冷凝在離子化室會造成漏電并使色譜基線不穩(wěn)，故檢測溫度應(yīng)高于150℃，一般控制250℃～350℃。

5、信號記錄處理系統(tǒng)

包括信號記錄和數(shù)據(jù)顯示等。氣相色譜儀檢測器得到的電信號經(jīng)過轉(zhuǎn)化放大后由數(shù)據(jù)處理機(jī)/積分儀/記錄儀/色譜工作站接收處理后成為色譜圖，可對樣品進(jìn)行定性定量分析。

氣相色譜儀組分定性與定量分析

1、組分定性分析

氣相色譜儀主要利用保留值定性，但在很多情況下，仍需借助其它手段。包括以下方法：利用保留時間定性;利用加入純物質(zhì)增加峰高法定性;利用相對保留值定性;利用碳數(shù)/沸點規(guī)律定性;利用保留指數(shù)定性;利用雙柱或多柱定性;利用檢測器定性;與其它方法結(jié)合定性。

2、組分定量分析

氣相色譜儀分析的依據(jù)是被測組分的質(zhì)量與其色譜峰面積/峰高成正比。

①歸一化法：

前提：試樣中所有組分都產(chǎn)生信號并能檢出色譜峰。

依據(jù)：組分含量與峰面積成正比。

優(yōu)點：簡便，準(zhǔn)確;定量結(jié)果與進(jìn)樣量、重復(fù)性無關(guān);色譜條件略有變化對結(jié)果幾乎無影響。

缺點：所有組分必須在一定時間內(nèi)都出峰;必須已知所有組分的校正因子。

②內(nèi)標(biāo)法：

氣相色譜儀定量加入樣品中不存在的對照物-內(nèi)標(biāo)物，以待測組分和內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)信號對比定量。

對內(nèi)標(biāo)物要求：

a、內(nèi)標(biāo)物須為原樣品中不含組分;

b、內(nèi)標(biāo)物與待測物保留時間應(yīng)接近且R>1.5;

c、內(nèi)標(biāo)物為高純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，或含量已知物質(zhì);

內(nèi)標(biāo)法優(yōu)點：

進(jìn)樣量不超量時，重復(fù)性及操作條件對結(jié)果無影響;只需待測組分和內(nèi)標(biāo)物出峰，與其他組分是否出峰無關(guān);內(nèi)標(biāo)法缺點：找合適內(nèi)標(biāo)物困難。

③外標(biāo)法(標(biāo)準(zhǔn)曲線法)

以待測組分純品為對照物，與試樣中待測組分的響應(yīng)信號相比較進(jìn)行定量的方法。

外標(biāo)法特點：不需要校正因子，不需要所有組分出峰;結(jié)果受進(jìn)樣量、進(jìn)樣重復(fù)性和操作條件影響大→氣相色譜儀每次進(jìn)樣量應(yīng)一致，否則產(chǎn)生誤差。